攪拌式多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理,即在密閉防爆玻璃反應(yīng)器中,按照已知的氨基酸序列(一般為C端羧基末端至N端氨基末端)不斷添加、反應(yīng)、合成,最終得到多肽載體。固相合成法大大減少了每一步產(chǎn)品精制的難度。為了防止副反應(yīng),參與反應(yīng)的氨基酸側(cè)鏈都受到保護(hù),羧基末端是游離的,在反應(yīng)之前必須活化。固相合成方法有Fmoc和tBoc兩種。
操作流程
攪拌式多肽合成儀的操作流程通常包括以下幾個(gè)步驟:
準(zhǔn)備工作:清洗反應(yīng)器、配制所需的溶液和試劑等。
裝載樹(shù)脂:將固相樹(shù)脂裝載到反應(yīng)器中,并進(jìn)行必要的預(yù)處理。
添加氨基酸和試劑:按照預(yù)定的氨基酸序列和反應(yīng)條件,通過(guò)自動(dòng)化控制系統(tǒng)向反應(yīng)器中添加氨基酸和試劑。
攪拌和反應(yīng):?jiǎn)?dòng)攪拌系統(tǒng),使反應(yīng)物在反應(yīng)器內(nèi)充分混合并進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)過(guò)程中,可以通過(guò)控制系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)條件和調(diào)整參數(shù)。
收集和純化:反應(yīng)完成后,通過(guò)適當(dāng)?shù)氖占b置收集多肽產(chǎn)品,并進(jìn)行必要的純化處理。